Quando Titian abordou o tema da Última Ceia por volta de 1560, já era uma figura proeminente na pintura veneziana, no entanto, ele se aproximou desta cena bíblica com uma ousadia que distingue sua versão. Ao contrário do célebre mural de Leonardo, que já havia alcançado fama em Milão, a interpretação de Titian foi pintada para uma comissão privada; seu patrono original ainda é debatido, embora alguns sugiram que poderia ter sido destinada a um refeitório de mosteiro. O destino da pintura tem sido envolto em incerteza: seu meio não está registrado de forma definitiva e é discutido com menos frequência do que outras obras de Titian, levando alguns a especular que pode ter sido ofuscada por suas peças de altar mais dramáticas e telas mitológicas. No coração da cena, Cristo se senta cercado por seus discípulos, justo quando pronuncia as palavras que instituem a Eucaristia: "Tomai, comei; este é o meu corpo." Titian captura a atmosfera carregada do momento, focando nas reações que se propagam pela mesa.

Os rostos dos apóstolos registram choque, confusão e devoção, enquanto suas mãos gesticulam em um diálogo animado. O uso da luz atrai o olhar para a figura calma e iluminada de Cristo, enquanto as sombras se aprofundam ao redor de Judas, que segura uma bolsa de dinheiro, um atalho visual para sua iminente traição. Comparado à composição altamente ordenada de Leonardo, o arranjo de Titian é mais solto e dinâmico, refletindo o amor veneziano pela cor e pelo movimento. A história posterior da Última Ceia é menos clara do que a dos comissionamentos mais grandiosos de Titian.

Alguns registros sugerem que permaneceu em um ambiente religioso, enquanto outros insinuam sua passagem por coleções privadas durante as turbulências dos séculos XVII e XVIII. Sua atribuição raramente foi questionada, graças ao manejo distintivo da pintura e à profundidade psicológica das figuras. Hoje, a pintura se ergue como um testemunho do estilo tardio de Titian, onde a pincelada se torna mais livre e a ressonância emocional se aprofunda, um desfecho adequado para um artista que moldou o curso do Renascimento em Veneza.