Tausende von kleinen Soldaten prallen auf einer Ebene unter einem Himmel aufeinander, in dem eine brennende Sonne gegen einen zunehmenden Mond kämpft, während Berge, Flüsse und ein Meer sich bis zu einem fernen Horizont erstrecken. Banner und Lanzen überfüllen die Szene, und eine hängende Tafel mit einer lateinischen Inschrift schwebt oben. Ein rotes Band von der Tafel lenkt den Blick zu Alexander dem Großen, der dem Wagen des fliehenden persischen Königs nachjagt. Die Szene zeigt Alexanders Sieg über Darius III.

bei Issus im Jahr 333 v. Chr. Das Gemälde wurde für einen Zyklus historischer Malereien in Auftrag gegeben, den Herzog Wilhelm IV.

von Bayern und seine Frau, Maria Jacobaea von Baden, 1528 für ihre Residenz in München in Auftrag gaben. In diesem Jahr entließ die Stadt Regensburg Albrecht Altdorfer von seinen offiziellen Pflichten, damit er ein großes Werk für den Herzog ausführen konnte, vermutlich dieses. Er basierte die Landschaft auf den Karten seiner Zeit, um einen Eindruck von der Ausdehnung von Alexanders Reich zu vermitteln. Das Museum verfolgt die Ursprünge der Sammlung der Alte Pinakothek bis zu diesem Zyklus.

Die später veränderte lateinische Inschrift gibt Details und Verluste der Schlacht an. Das Paneel befindet sich in der Alte Pinakothek in München.