Christus hängt im Zentrum gekreuzigt, den Kopf geneigt, während Gott der Vater das Kreuz stützt und nach außen blickt, umgeben von einer Schar cherubischer Gesichter und einer Taube, die zwischen ihnen schwebt. Links steht Maria Magdalena barfuß auf steinigem Boden, ihre Hände in einer intensiven Gebetsgeste erhoben, ihr langes Haar fällt locker; rechts zeigt Johannes der Täufer emphatisch auf Christus, sein Ausdruck ist ernst. Unten, in viel kleinerem Maßstab, führt der Erzengel Raphael Tobias, der einen Fisch trägt, durch den Vordergrund, ihre Figuren sind vom Hauptgruppe oben getrennt.

Dieses Altargemälde wurde von der Zunft der Ärzte und Apotheker für die Kirche Santa Elisabetta delle Convertite in Florenz in Auftrag gegeben und war für eine Gemeinschaft von Frauen gedacht, die ein Leben in Prostitution hinter sich gelassen hatten, mit Maria Magdalena als ihrer Schutzpatronin. Technische Untersuchungen haben ergeben, dass Tobias und der Engel ursprünglich in einer anderen Position gemalt wurden und später an ihren aktuellen Platz verschoben wurden, und dass ihr Stil sich von den größeren Figuren darüber unterscheidet, was auf unterschiedliche Hände und Ausführungszeiträume hindeutet. Die Komposition vereint die Heilige Dreifaltigkeit, Maria Magdalena, Johannes den Täufer und die Geschichte von Tobias und dem Engel und spiegelt die religiösen und sozialen Anliegen Florenz' im späten fünfzehnten Jahrhundert sowie die vielfältigen Beiträge von Botticelli und seiner Werkstatt wider.