Ein reich gekleideter Mann, der einen Turban und eine Krone trägt, weicht erschrocken zurück, während eine leuchtende Hand hebräische Buchstaben an eine dunkle Wand zu seiner rechten schreibt. Der goldene Umhang des Mannes ist schwer bestickt und mit Perlen und Ketten verziert, und seine linke Hand ist in einer dramatischen Geste erstarrt, während seine rechte Hand auf einem goldenen Teller am Bankettisch drückt. Zu seiner Linken lässt eine Frau mit einem Perlenkopfschmuck und einem roten Kleid einen Becher fallen, ihr Körper dreht sich schockiert weg, während eine andere Frau mit aufwendigem Haar und Perlen sich nach vorne lehnt, ihr Gesicht dem König zugewandt.

Hinter dem König starren zwei ältere Männer, einer mit Bart und der andere mit langen, lockigen Haaren und einem mit Juwelen besetzten Stirnband, voller Angst nach oben auf die Erscheinung, ihre Hände alarmiert erhoben. Auf dem Tisch sind ein goldener Teller, ein Messer und ein Haufen Trauben von einem starken, gerichteten Licht beleuchtet, das von oben rechts fällt, tiefe Schatten wirft und die metallischen Oberflächen hervorhebt. Die geheimnisvolle Hand taucht aus einer Wolke aus Rauch oder Nebel auf und schreibt vier vertikale Spalten hebräischer Schrift, die mit einem unheimlichen, übernatürlichen Licht leuchten.

Der Hintergrund ist dunkel und undefiniert, was die Aufmerksamkeit auf die erschreckten Figuren und das übernatürliche Ereignis im Zentrum lenkt. Rembrandt verwendet dicke, texturierte Pinselstriche, um die luxuriösen Stoffe und Juwelen zu modellieren, wobei er das schimmernde Gold und die Perlen mit den tiefen Schwarz- und Brauntönen der Umgebung kontrastiert. Die Komposition ist eng angeordnet, wobei der ausgestreckte Arm des Königs den Blick des Betrachters auf die wunderbare Schrift an der Wand lenkt. Das Gastmahl des Belsazar wurde von Rembrandt etwa 1636–1638 gemalt, während der Zeit, die als Goldenes Zeitalter der niederländischen Malerei bekannt ist.