Als Titian 1548 Porträt von Isabella von Portugal malte, hatte er sein Modell nie getroffen. Die Kaiserin war ein Jahrzehnt zuvor gestorben, und der Künstler wurde von ihrem Sohn, Philipp II. von Spanien, beauftragt, ein Bild zu schaffen, das ihr Andenken ehren und als dynastisches Symbol dienen sollte.

Basierend auf früheren Abbildungen, darunter ein verlorenes Porträt von Jan Cornelisz Vermeyen, schuf Titian eine idealisierte Vision der Frau, deren Ehe mit Karl V. zwei der größten Mächte Europas vereint hatte. Das resultierende Porträt wurde zum offiziellen Bild von Isabella, das in Radierungen reproduziert und über Generationen von Hofmalern kopiert wurde. Isabella erscheint sitzend, leicht nach rechts gedreht, ihr Blick ist fest und zurückhaltend.

Sie trägt ein dunkles Samtkleid, das mit Gold und Perlen verziert ist, ihre Hände ruhen ruhig auf einem Tisch und ein weißes Taschentuch—ein Symbol der Reinheit—wird zwischen ihren Fingern gehalten. Das reiche, warme Licht spielt über ihr Gesicht und verleiht ihr eine Aura von Würde und Zurückhaltung, während der schwere Vorhang hinter ihr die Kaiserin von weltlichen Ablenkungen isoliert. Im Gegensatz zu Hans Holbeins strengeren Porträts von königlichen Frauen verleiht Titian der Szene eine Sanftheit, die sowohl Autorität als auch Menschlichkeit suggeriert.

Das subtile Zusammenspiel zwischen den prächtigen Stoffen und Isabellas gefasster Miene erzählt von ihrer doppelten Rolle als Souveränin und Mutter. Die Reise des Gemäldes spiegelt seine Bedeutung wider: Es wurde für die private Sammlung von Philipp II. in Auftrag gegeben und wurde zu einem Modell für nachfolgende Darstellungen von Isabella am spanischen Hof. Im Laufe der Jahrhunderte wurde das Werk zwischen königlichen Palästen bewegt und gelangte schließlich in die Bestände des Museo del Prado, wo es heute noch ist.

Die Frage der Urheberschaft ist gelegentlich aufgekommen, da die Beteiligung von Werkstätten in Titians späteren Jahren üblich war, aber die Qualität der Pinselstriche und die psychologische Tiefe des Modells lassen wenig Zweifel an der Hand des Meisters. Porträt von Isabella von Portugal steht als Zeugnis für Titians Fähigkeit, nicht nur die Ähnlichkeit, sondern auch das Erbe einer Königin zu formen.