Una joven se sienta en tres cuartos ante una logia abierta, su mirada pálida se encuentra con la del espectador mientras sostiene un pequeño unicornio en sus brazos. El unicornio, símbolo de castidad, sugiere que el retrato estaba destinado a mostrar la virtud de la modelo y su idoneidad para el matrimonio. La composición recuerda de cerca a la Mona Lisa de Leonardo, con la figura enmarcada por columnas y un paisaje distante, sin embargo, la expresión de la modelo se describe como fría y vigilante en lugar de enigmática.

Un examen técnico reveló que Rafael originalmente esbozó un pequeño perro—un emblema de fidelidad—debajo del unicornio, pero lo dejó sin terminar y lo reemplazó con la criatura mítica. En el siglo XVII, la pintura fue sobrepintada en gran medida para transformar a la modelo en Santa Catalina de Alejandría, pero la restauración del siglo XX eliminó estas adiciones y restauró la visión original de Rafael. Pintado alrededor de 1505–1506, Retrato de una joven con un unicornio se sitúa en el umbral del periodo maduro del Alto Renacimiento de Rafael, reflejando su compromiso con el retrato florentino contemporáneo.