Lorsque Titien a peint L'Agonie dans le jardin en 1558, il était déjà célèbre à travers l'Europe, mais cette œuvre se distingue par son approche inhabituellement personnelle d'un sujet souvent traité avec grandeur. Plutôt qu'une narration sweeping, Titien a choisi une scène intime et nocturne, se concentrant sur la lutte silencieuse du Christ à Gethsémani. La date de la peinture la place dans la phase tardive de la carrière de l'artiste, lorsque sa touche est devenue plus lâche et ses couleurs plus atmosphériques — un changement qui influencerait des générations de peintres.

De manière inhabituelle, aucun commanditaire original n'est fermement enregistré pour cette œuvre, et sa provenance précoce reste incertaine, ajoutant à son aura de mystère. Le moment choisi par Titien est celui où le Christ s'agenouille en prière, quelques instants avant son arrestation, tandis que ses disciples dorment à proximité, inconscients de son angoisse. Un ange descend de l'obscurité, offrant un calice — un symbole de la souffrance que le Christ doit accepter. Les bleus profonds et les verts ombragés du jardin enveloppent les figures, tandis que le visage et les mains illuminés du Christ attirent le regard vers son isolement et sa détermination.

Les disciples, affalés d'épuisement, sont rendus dans un flou plus doux, leur vulnérabilité contrastant avec la posture tendue du Christ. Contrairement à l'ancienne Agonie dans le jardin plus structurée de Andrea Mantegna, Titien dissout les formes dans la nuit, mettant l'accent sur l'émotion plutôt que sur la clarté. L'histoire précoce de la peinture est obscure ; on ne sait pas avec certitude qui l'a possédée en premier ou comment elle a voyagé, bien qu'au XVIIe siècle, elle ait été enregistrée en Espagne. Aujourd'hui, elle est accrochée au Museo del Prado, où elle est considérée comme un exemple clé de l'œuvre religieuse tardive de Titien.

La touche lâche et la palette mélancolique marquent un départ de son style précédent, plus poli, reflétant la vision évolutive de l'artiste dans ses dernières années. Bien que le médium ne soit pas documenté de manière définitive, la surface picturale de l'œuvre et sa couleur éclatante sont des caractéristiques de la technique vénitienne de Titien. Sa présence au Prado souligne l'admiration espagnole durable pour la peinture vénitienne, et pour Titien en particulier.