Due donne bloccano un uomo su un letto mentre una, afferrandogli la testa, gli taglia la gola con una lunga spada; il sangue scorre sulle lenzuola bianche mentre gli occhi dell'uomo rimangono spalancati, consapevole ma impotente. Il drammatico contrasto di luce e ombra isola le figure su uno sfondo scuro, focalizzando l'attenzione sulla lotta e sull'atto di uccidere. La compagna di Giuditta, Abra, tiene il braccio della vittima con entrambe le mani mentre lui si spinge indietro invano, mentre le maniche di entrambe le donne sono arrotolate, i loro volti segnati dalla determinazione.

Artemisia Gentileschi dipinge il momento del Libro di Giuditta in cui la vedova ebrea, con la sua ancella, assassina il generale assiro Oloferne per salvare la sua città assediata. Rispetto al suo trattamento precedente del tema, Gentileschi qui affina la composizione e i dettagli, utilizzando il realismo e un forte chiaroscuro per intensificare la violenza e la tensione della scena. Quest'opera è vista come una dichiarazione di donne forti, con Giuditta e Abra che agiscono di concerto per sopraffare il loro nemico, piuttosto che come una semplice immagine di violenza o vendetta.