Quando Raffaello dipinse Ritratto di Agnolo Doni intorno al 1500, stava rispondendo a una sfida lanciata dalla crescente classe mercantile di Firenze: eguagliare la grandezza dei ritratti nobili con le proprie somiglianze. Agnolo Doni, un prospero mercante di tessuti, commissionò il suo ritratto—e quello della sua nuova moglie, Maddalena Strozzi—proprio nel momento in cui Firenze si stava trasformando nel crogiolo dell'Alto Rinascimento. I ritratti Doni sono tra le prime associazioni conosciute di marito e moglie nell'arte italiana, destinati a essere appesi fianco a fianco nella loro casa.

Questa doppia commissione era una dichiarazione di status, gusto e aspirazione, collocando i Doni nella stessa tradizione visiva dei Medici. I dipinti avrebbero poi ispirato il Doni Tondo di Michelangelo, un testamento all'ambizione dei Doni di essere immortalati dai più grandi artisti del loro tempo. Agnolo ci guarda in vista tre quarti, con le mani tranquillamente ripiegate su un parapetto di marmo, gli occhi fissi, le labbra serrate in un mezzo sorriso riservato. Il paesaggio dietro di lui sfuma in una foschia blu-verde, un espediente che Raffaello ha preso in prestito dalla Mona Lisa di Leonardo da Vinci, ma qui la posa del soggetto è più diretta, il suo sguardo più franco.

Il doppio petto nero e la semplice camicia bianca sono segni di una ricchezza sobria, mentre l'anello sul suo dito allude al suo recente matrimonio. La luce fresca e uniforme mette in risalto la morbidezza della sua pelle e il fine dettaglio dei suoi capelli, enfatizzando sia la giovinezza del soggetto sia la precisione del pittore. A differenza dei ritratti fiorentini precedenti, che spesso presentano i loro soggetti in profilo rigoroso, l'approccio di Raffaello invita lo spettatore a uno scambio silenzioso con Agnolo—una sottile affermazione di individualità e presenza. Il percorso esatto di Ritratto di Agnolo Doni dopo la sua creazione non è completamente documentato, ma si sa che è rimasto nella famiglia Doni per generazioni prima di entrare nella collezione della Galleria degli Uffizi a Firenze, dove oggi è appeso accanto al suo ritratto compagno di Maddalena.

Quest'opera segna un punto di svolta nella carriera di Raffaello, mentre passava dall'influenza del suo maestro Perugino verso le innovazioni compositive della scuola fiorentina. I ritratti Doni sono celebrati per la loro intuizione psicologica e il loro raffinamento tecnico, qualità che sarebbero venute a definire i capolavori successivi di Raffaello a Roma. Oggi, il dipinto è ammirato non solo come un ritratto di un mercante fiorentino, ma anche come un traguardo nell'evoluzione del ritratto rinascimentale.