Элеонора Гонзага сидит, слегка повернувшись влево, ее правая рука покоится на темном мехе куницы, а взгляд спокоен и сдержан. Она одета в бархатное платье, украшенное золотыми бантиками, и головной убор с золотой вышивкой, что отражает северо-итальянскую моду, популяризированную Изабеллой д'Эсте. Ювелирные изделия — каплевидные жемчужины на шее, жемчужные серьги и кольца — подчеркивают ее статус и намекают на чистоту.

Золотой пояс с головой куницы, инкрустированной драгоценными камнями, свисает с ее талии, в то время как из рукавов вырываются шелковые пуфы, а белый шелковый воротник с золотым краем обрамляет ее лицо. За ней окно, показывающее зеленый пейзаж под голубым небом, а под ним маленький столик, на котором спит пятнистая собака и стоит изысканные золотые часы с фигуркой на вершине. Собака и часы, оба повторяющиеся мотивы в работах Тициана, символизируют верность и течение времени, а также отражают интересы двора Урбино.

Портрет Элеоноры Гонзага делла Ровере был написан Тицианом в 1530-х годах в паре с портретом ее мужа и стал образцом для его последующих портретов. Эта работа принадлежит венецианской школе, и ее цветовая гамма и детали напоминают гербовые цвета семьи Монтефельтро, от которой делла Ровере унаследовали свое герцогство.