Eleonora Gonzaga est assise légèrement tournée vers la gauche, sa main droite reposant sur le pelage sombre d’une martre, son regard est calme et réservé. Elle porte une robe en velours ornée de nœuds dorés et un diadème brodé d’or, évoquant la mode du nord de l’Italie popularisée par Isabella d’Este. Les bijoux—des perles en forme de goutte autour de son cou, des boucles d’oreilles en perles et des bagues—signalent son statut et font référence à la pureté.

Une ceinture en cordon doré avec une tête de martre ornée de bijoux pend de sa taille, tandis que des volants en soie émergent de ses manches et un col en soie blanche bordé d’or encadre son visage. Derrière elle, une fenêtre montre un paysage verdoyant sous un ciel bleu, et une petite table en dessous supporte un chien tacheté endormi et une horloge dorée ornée surmontée d’une statuette. Le chien et l’horloge, deux motifs récurrents dans l’œuvre de Titien, symbolisent la fidélité et le passage du temps, et reflètent également les intérêts de la cour d’Urbino.

Portrait d’Eleonora Gonzaga della Rovere a été peint par Titien dans les années 1530 comme un pendant du portrait de son mari, et est devenu un modèle pour ses portraits ultérieurs. Cette œuvre appartient à l’école vénitienne et sa coloration et ses détails rappellent les couleurs héraldiques de la famille Montefeltro, dont les della Rovere ont hérité du duché.