Als Madonna mit dem Fisch 1513 aus den Händen von Raphael kam, war es für den spanischen Hof bestimmt, eine seltene Reise für ein Altarbild der Hochrenaissance. Beauftragt für die Kapelle San Domenico in Neapel von Kardinal Giovanni Domenico De Cupis, spiegelt die Reise des Gemäldes von Rom nach Süditalien und schließlich nach Madrid den Einfluss von Raphael's Ruhm in ganz Europa wider. Seine Ankunft in Spanien war so bedeutend, dass Antonio Palomino es 1667 hervorhob und es als "eines der seltensten und kostbarsten Gemälde der königlichen Sammlung" bezeichnete.

Nur wenige Werke von Raphael reisten zu seinen Lebzeiten so weit. Der Moment, den Raphael wählte, ist einer ruhiger Offenbarung: Der Erzengel Raphael stellt dem jungen Tobias und seinem wundersamen Fisch die Jungfrau und das Kind vor, während der heilige Hieronymus zusieht. Der Fisch, der in Tobias' Händen gehalten wird, ist kein bloßes Requisit; er spielt auf die Heilung der Blindheit seines Vaters im Buch Tobit und auf das Sakrament der Taufe an. Die führende Geste des Erzengels und die Kette, die Tobias mit Raphael verbindet, symbolisieren den göttlichen Schutz.

Der heilige Hieronymus, mit seinem Löwen, erinnert den Betrachter an seine Rolle als Übersetzer der Vulgata, die das Alte und das Neue Testament verbindet. Im Gegensatz zu Andrea del Verrocchio’s dramatischerem Tobias und der Engel ist Raphael’s Komposition ruhig, ihre Figuren verbunden durch sanfte Blicke und weiches Licht. Als Objekt hat Madonna mit dem Fisch eine geschichtsträchtige Existenz geführt. Nach ihrer Zeit in Neapel gelangte sie in die spanische königliche Sammlung, überstand die Umwälzungen der napoleonischen Invasion und blieb ein geschätzter Besitz der spanischen Krone.

Ihre Zuschreibung an Raphael hat nie ernsthaft geschwankt, und heute hängt sie im Museo del Prado, wo sie als Spätwerk gefeiert wird, das nur wenige Jahre vor dem Tod des Künstlers 1520 vollendet wurde. Das Gemälde steht als Zeugnis für Raphael’s Fähigkeit, Theologie, Erzählung und Anmut zu vereinen und italienische und spanische Geschmäcker auf dem Höhepunkt der Renaissance zu verbinden.