Eine dicht gedrängte Menge drängt sich unter einem groben Holzdach vor, wo die Jungfrau Maria das Christkind auf ihrem Schoß hält, während drei reich gekleidete Figuren Geschenke zu ihren Füßen präsentieren. Die Szene zeigt die Anbetung der Heiligen Drei Könige, wobei der alte Kaspar vorne kniet, Melchior sich nach links verneigt und Balthasar rechts steht, jeder durch sein Alter, sein Kostüm und die Gefäße, die sie mitbringen, unterschieden. Bruegel füllt die Komposition mit großen, individualisierten Gesichtern, die jeweils unterschiedlich auf das heilige Ereignis reagieren, und betont die Vielfalt menschlicher Ausdrucksformen anstelle idealisierter Schönheit.

Gemalt im Jahr 1564, markiert Die Anbetung der Könige einen Wendepunkt in Bruegels Werk, da es eines seiner wenigen Gemälde im Hochformat ist und das erste, das sich fast ausschließlich auf monumentale Figuren konzentriert.