В центре длинного стола сидит Иисус Христос в спокойной изоляции, его правая рука открыта на столе, а левая поднята, обрамленная светом от далекого пейзажа, видимого через три окна за его спиной. Двенадцать апостолов расположены в четырех группах по три человека с каждой стороны, каждая фигура реагирует на момент, когда Иисус объявляет, что один из них предаст его, с помощью различных жестов и выражений лиц. Свет падает слева, освещая фигуры и отбрасывая мягкие тени, в то время как цветовая гамма доминирует холодными синими и теплыми земляными тонами, а одежда Иисуса в ярких красных и синих тонах находится в центре.

Поверхность картины показывает участки износа и реставрации, с видимыми трещинами и выцветшими участками, однако ясность композиции и выразительные линии фигур остаются впечатляющими. Перспективные линии потолка и стен сходятся на голове Христа, подчеркивая его центральную роль и организуя сцену с математической точностью. На самом левом краю стола фигура в зеленом и синем наклоняется вперед, опираясь обеими руками на стол, его лицо обращено к группе рядом с ним.

На правом краю двое фигур в светлых одеждах ведут беседу, один из них жестом обеих рук указывает на другого. На столе разбросаны кусочки хлеба, маленькие тарелки и синие и белые керамические чашки, а на переднем крае стола лежит длинная белая скатерть с едва заметными вертикальными полосками. Тайная вечеря была создана Леонардо да Винчи в 1490-х годах для столовой монастыря Санта-Мария-делле-Грацие в Милане.

Техника живописи, использующая темпера на гипсе, позволила проводить регулярные исправления, но также способствовала ее хрупкости и обширной реставрации, которой она подверглась.