Немногие картины Эль Грека вызвали столько споров среди ученых, как Святая Дева и Младенец с Святой Анной. Хотя точная комиссия остается неопределенной, работа примечательна своей редкой темой в творчестве художника и существованием как минимум одной другой версии, ныне находящейся в Музее Прадо. Вихревая энергия картины и вытянутые фигуры заставили некоторых предположить, что она предназначалась для частного поклонения, а не для публичного показа.

Ее необычная композиция и нежное, почти театральное взаимодействие между фигурами сделали ее важной в обсуждениях о зрелом стиле Эль Грека около 1600 года. В центре сцены Святой Анна, мать Святой Девы Марии, сидит защитно за своей дочерью и Младенцем Христом. Эль Грека выбирает момент интимного контакта: рука Анны нежно лежит на плече Марии, в то время как Мария наклоняется вперед, представляя младенца Иисуса зрителю. Троица заключена в треугольные объятия, их вытянутые формы и выразительные жесты типичны для позднего периода Эль Грека.

Вихревая драпировка и неземной свет сосредотачивают внимание на Младенце Христе, который поднимает руку в благословении. В отличие от знаменитой картины Леонардо Святая Дева и Младенец с Святой Анной, которая подчеркивает психологическую сложность, версия Эль Грека полностью посвящена духовной непосредственности и мистической связи между поколениями. Путешествие этой картины через историю не полностью задокументировано, но в целом считается, что она была создана в продуктивные годы Эль Грека в Толедо, около 1600 года. Ее стиль отражает поздний манер художника, когда его фигуры становились более вытянутыми, а цвета более смелыми.

Происхождение картины до ее поступления в современную музейную систему неясно, что является общей судьбой многих работ Эль Грека, созданных для местных покровителей или религиозных учреждений в Испании. Сегодня Святая Дева и Младенец с Святой Анной служит свидетельством уникального видения художника, соединяющего византийскую традицию и выразительные высоты испанского Ренессанса.