Margareta van Eyck erscheint im Dreiviertelprofil, die Hände gefaltet und der Blick ruhig, vor einem schwarzen, charakterlosen Hintergrund. Sie trägt ein rotes Wollkleid mit grauem Pelzbesatz und eine weiße, hornartige Haube mit komplizierten, gekräuselten Leinenfalten; ihr Kopfschmuck und ihre Arme bilden ein geometrisches Muster, das ihr Gesicht umrahmt. Jan van Eyck malte dieses Porträt 1439 und stellte seine Frau mit einer direkten und intimen Präsenz dar, die für die damalige Zeit ungewöhnlich war.

Der Künstler gab ihr einen unverhältnismäßig großen Kopf und eine hohe Stirn, wodurch die Aufmerksamkeit auf ihre Gesichtszüge gelenkt wird, und fügte das Detail eines leichten Schielens in ihrem linken Auge hinzu. Auf dem Rahmen sind griechische Buchstaben eingraviert, die besagen, dass ihr Ehemann Johannes das Werk 1439 vollendete, als sie 33 Jahre alt war, zusammen mit seinem persönlichen Motto. Eine technische Untersuchung und Reinigung im Jahr 1998 offenbarte die ursprüngliche Oberfläche unter Jahrhunderten von Schmutz und Verfärbung.

Porträt von Margareta van Eyck ist eines der frühesten bekannten europäischen Porträts einer Künstlersfrau und gehört zu den letzten Werken, die Jan van Eyck vollendete.