Margareta van Eyck apparaît en vue de trois quarts, les mains jointes et le regard serein, sur un fond noir et sans caractéristiques. Elle porte une robe en laine rouge bordée de fourrure grise et un voile blanc à cornes avec des plis de lin frisés complexes ; son couvre-chef et ses bras forment un motif géométrique qui encadre son visage. Jan van Eyck a peint ce portrait en 1439, représentant sa femme avec une présence directe et intime inhabituelle pour l'époque.

L'artiste lui a donné une tête démesurément grande et un front haut, attirant l'attention sur ses traits du visage, et a inclus le détail d'un léger strabisme dans son œil gauche. Inscrites sur le cadre se trouvent des lettres grecques indiquant que son mari Johannes a terminé l'œuvre en 1439, lorsqu'elle avait 33 ans, accompagnées de sa devise personnelle. Un examen technique et un nettoyage en 1998 ont révélé la surface originale sous des siècles de saleté et de décoloration.

Portrait de Margareta van Eyck est l'un des plus anciens portraits européens connus d'une épouse d'artiste et figure parmi les dernières œuvres que Jan van Eyck a complétées.