In una mossa rara del suo periodo spagnolo, El Greco dipinse più di una versione della Sacra Famiglia, ma Sacra Famiglia con Santa Anna si distingue per la sua disposizione intima, quasi mistica, delle figure. A differenza dei formali altari dei suoi contemporanei, quest'opera attira lo spettatore in un cerchio familiare privato, una composizione così sorprendente che artisti successivi — incluso Francisco de Zurbarán — avrebbero rivisitato la sua struttura insolita. Le origini del dipinto non sono del tutto chiare, ma il suo stile distintivo e la presenza di Santa Anna, la madre della Vergine, suggeriscono che fosse destinato a un ambiente devozionale privato, piuttosto che a un grande incarico ecclesiastico. Qui, El Greco cattura un momento di rivelazione tranquilla: il bambino Cristo, cullato dalla Vergine Maria, si allunga verso Santa Anna, mentre Giuseppe osserva protettivamente da dietro.

I corpi allungati e i drappeggi vorticosi, tratti distintivi dello stile manierista tardo di El Greco, intensificano la tensione spirituale. Il gesto di Santa Anna — la sua mano che guida dolcemente il Bambino Cristo — segnala il suo ruolo di custode del destino della Sacra Famiglia. La luce entra dall'angolo in alto a sinistra, illuminando i volti e le mani, e gettando il fondo in ombra, un dispositivo che attira lo sguardo verso il triangolo centrale di amore e discendenza.

Rispetto a La Vergine e il Bambino con Santa Anna di Leonardo da Vinci, le figure di El Greco sembrano galleggiare, meno ancorate nello spazio terreno, le loro forme plasmate tanto dalla fede quanto dalla carne. Il percorso preciso di questo dipinto attraverso la storia è incerto, poiché i registri dell'atelier di El Greco a Toledo sono incompleti. È probabile che sia rimasto in Spagna, passando per mani private prima di entrare in una collezione pubblica. Oggi è riconosciuto come un'opera chiave del periodo maturo dell'artista, quando la sua visione unica era completamente formata e la sua reputazione a Toledo era sicura.

I colori audaci del dipinto, le forme espressive e l'intensità spirituale lo contraddistinguono come un punto di svolta nell'arte spagnola, collegando il fervore mistico della Controriforma con la devozione personale dei suoi spettatori. La sua sopravvivenza e la sua prominenza oggi sono una testimonianza della duratura fascinazione per l'approccio singolare di El Greco ai temi sacri.