Nel 1635, la città di Firenze si preparava ad accogliere il primogenito del Granduca, e la ricca confraternita laica di San Giovanni Battista commissionò a Artemisia Gentileschi di dipingere una scena che celebrasse la nascita del santo patrono della città. Fu un onore insolito per un'artista donna, soprattutto nel mondo dominato dagli uomini della Firenze barocca. La commissione collocò Gentileschi al centro delle festività dei Medici, e la sua opera sarebbe stata esposta nel grande salone del Palazzo della Gherardesca, dove si riuniva l'élite della città.

Non si conosce alcuna altra versione della Natività di San Giovanni Battista della sua mano, rendendo questo un testamento singolare dei suoi anni fiorentini. Il dipinto cattura il frenetico momento successivo al miracoloso parto di Elisabetta, come raccontato nel Vangelo di Luca. Al centro, il neonato Giovanni giace avvolto, assistito da levatrici e sorvegliato dalla madre anziana, Elisabetta, che si reclina sul letto con un gesto di affaticamento e sollievo. La scena è viva di dettagli domestici: una serva versa acqua per il primo bagno del bambino, mentre un'altra prepara lenzuola, i loro volti illuminati da un raggio di luce che cade drammaticamente nella stanza.

A differenza della austera e tesa Nascita di San Giovanni Battista di Caravaggio, Gentileschi infonde alla sua composizione calore e solidarietà tra donne, enfatizzando la cura comunitaria che circonda sia la madre che il bambino. Il bagliore dorato e i gesti attenti trasformano un miracolo biblico in una scena di tenerezza quotidiana. Sebbene alcuni dettagli del percorso del dipinto rimangano incerti, è chiaro che la Natività di San Giovanni Battista ha segnato un momento culminante nel periodo fiorentino di Gentileschi, quando godeva del patrocinio della corte dei Medici. Nel corso dei secoli, l'opera è stata spostata dalla sua posizione originale e la sua attribuzione è stata occasionalmente dibattuta, sebbene la ricerca moderna affermi la sua paternità.

Oggi, il dipinto è conservato nel Museo del Prado, dove si erge come un raro esempio di narrazione religiosa su larga scala da parte di un'artista donna del Barocco. La sua sopravvivenza e riconoscimento riflettono sia le fortune mutevoli della sua creatrice che il potere duraturo della sua visione.