Uma figura nua está à extrema esquerda, levantando o dedo para o céu, enquanto um grupo de figuras ricamente vestidas no centro arrasta um jovem semi-nu por um chão vermelho em direção a um homem barbudo em um trono cujas orelhas se assemelham às de um burro. Duas mulheres sussurram nos ouvidos alongados do rei enquanto ele estende a mão, com os olhos voltados para baixo, enquanto outra figura atrás do grupo principal gesticula em direção ao rosto do rei como se tentasse bloquear sua visão. A arquitetura está repleta de elaborados relevos escultóricos e detalhes dourados, emoldurando a dramática procissão sob um céu pálido.

Calúnia de Apeles foi criada por Sandro Botticelli após uma descrição escrita de uma pintura perdida do antigo artista grego Apeles, conforme preservado por Luciano. As figuras representam personificações de vícios e virtudes: a Verdade aponta para cima, o Arrependimento está envolto em preto, a Calúnia arrasta a vítima pelos cabelos, enquanto o Fraude e o Rancor manipulam a cena, e a Ignorância e a Suspeita sussurram para o Rei Midas. Este tema, recomendado aos artistas por Leon Battista Alberti e amplamente discutido na Itália renascentista, permitiu a Botticelli reconstruir uma lendária composição perdida quase na íntegra, baseando-se na tradição da ekfrase.

Ao contrário de suas maiores pinturas mitológicas, esta obra é semelhante em tamanho à sua Natividade Mística e pode ter sido feita para seu próprio uso, sendo sua última pintura secular sobrevivente.