Un jeune homme armé d'un arc et accompagné d'un chien fait irruption dans une scène isolée, surprenant un groupe de femmes nues rassemblées autour d'une fontaine en pierre sous les arches d'un temple en ruine dans les bois. La figure centrale, pâle et couronnée d'une lune croissante, est protégée par une femme à la peau plus foncée à droite, tandis que les autres nymphes réagissent avec alarme, se tournant pour se couvrir ou se tournant vers la déesse pour obtenir des conseils. Diane et Actéon montre le moment des Métamorphoses d'Ovide où Actéon, après avoir chassé, tombe sur la déesse Diane et ses nymphes, une rencontre qui conduira à sa transformation et à sa mort.

Titien situe ce drame mythologique non pas dans une clairière forestière, mais dans les ruines arquées d'un temple, ajustant le cadre traditionnel pour renforcer le sentiment d'intrusion et de violation sacrée. Cette peinture fait partie de la célèbre série de poésies de l'artiste et a été créée dans les années 1550, aux côtés de Diane et Callisto, utilisant le même style et la même approche pour les deux œuvres.