Un soldat et une femme confrontent un homme âgé dans une pièce faiblement éclairée ; elle lui fait signe tandis qu'il recule, les mains levées dans un déni anxieux. Le Reniement de Saint Pierre montre le moment où Pierre nie connaître Jésus après l'arrestation, avec Saint Pierre, un soldat et une femme représentés à mi-hauteur et à taille humaine. Caravaggio a achevé cette œuvre vers 1610, probablement à Naples, et elle est considérée comme l'une de ses deux dernières peintures.

La peinture est rapidement passée entre les mains du peintre Guido Reni, qui l'a utilisée pour régler des dettes en 1613, et son influence peut être vue dans les œuvres de José de Ribera et Lionello Spada. Le Reniement de Saint Pierre appartient au mouvement baroque, et sa composition dramatique et son éclairage sont caractéristiques du style tardif de Caravaggio.