Sur une colline surplombant un paysage toscan, la Vierge Marie s'agenouille en prière devant l'enfant Jésus nouveau-né, qui repose nu sur son manteau bleu au premier plan. À droite, Joseph est assis en tailleur sur une selle, conversant avec deux bergers, dont l'un fait un geste vers le haut tandis que l'autre regarde vers le ciel. Cinq anges se tiennent ensemble à gauche, deux jouant de la flûte et deux chantant, leurs robes et poses évoquant la sculpture classique.

Un bœuf et un âne occupent une étable en pierre délabrée avec un toit en bois incliné, peint sous un angle oblique derrière la Sainte Famille. Une pie se perche sur le toit, tandis qu'un chardonneret apparaît dans un buisson à gauche, entouré d'autres plantes et oiseaux. La Nativité a été peinte par Piero della Francesca pour le palais de sa famille à Borgo Sansepolcro, et on pensait autrefois qu'il s'agissait d'un autel, mais on croit maintenant qu'il était accroché dans une chambre.

La scène est inspirée par une vision de Sainte Brigitte de Suède, qui a influencé les représentations de la Nativité au XVe siècle. La peinture date de 1470-75 et est l'une des dernières œuvres achevées par Piero della Francesca avant sa mort en 1492, reflétant les idéaux du Renaissance précoce.